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細胞凋亡(Apoptosis)檢測Bug多,解決妙招不能少!

細胞凋亡(Apoptosis)檢測Bug多,解決妙招不能少!

 

細胞凋亡(Apoptosis)檢測Bug多,解決妙招不能少!

 

 

背景介紹

細胞凋亡與許多疾病都有密切關係。如:腫瘤、免疫系統疾病、AIDS、心血管疾病、肝臟疾病、微生物疾病以及一些皮膚病等;透過誘導或抑制細胞凋亡為相關疾病的治療提供了一種新的思路。


另外,據相關資料統計顯示全球每年腫瘤發病率和死亡率持續不斷上升,嚴重威脅人類的健康。如何能更快速的尋找到安全有效的抗腫瘤藥物便成為全人類關注的問題;而抗腫瘤藥物的篩選中的一個環節就涉及到誘導腫瘤細胞凋亡實驗。


因此細胞凋亡研究已成為生命科學研究領域的熱門課題,隨著分子生物學技術的進步,細胞凋亡的研究進入了高速發展時期,近幾年期間也有關於細胞凋亡調控研究的大量文獻發表。

 

研究現狀及痛點分析

目前關於細胞凋亡檢測的手段和方法很多,其中應用最廣泛、靈敏度最高的方法是利用特異性識別外翻細胞膜上Phosphatidylserine(PS)的Annexin V 染色法以及基於 DNA 片段化檢測的 TUNEL 法。然而這兩種方法也存在著一些使用上的局限性:

 

1. TUNEL法

不僅能夠識別凋亡細胞中由核酸內切酶催化產生的DNA斷裂位點,而且能夠識別有絲分裂時,DNA複製產生的切口和Histone轉錄後修飾位點,以及壞死細胞的隨機DNA斷裂位置。因此,TUNEL法對於細胞凋亡檢測的特異性並不高,無法區分凋亡細胞、有絲分裂的細胞和壞死細胞。

 

2. Annexin V 染色法

不適合作為組織樣本的檢測方法。實驗過程中有時會涉及到需要在組織中進行的凋亡原位檢測 (In situ cell death detection),且組織樣本可能是保存在液態氮中而非新鮮樣本。這種情況下Annexin V就不適用。因為該方法牽涉到流式細胞分析儀 (FC),流式細胞分析要求細胞分散、單細胞、活性好。這樣才能區分死亡、凋亡和活性細胞。而組織在凍存、回溫的過程中會有大量的細胞死亡,經過這一過程的組織在分離成單個細胞的時候會形成許多細胞碎片,因此,不適合使用流式細胞檢測方法。

總之,任何單一的檢測方法和手段都不能全面且準確的反應出細胞凋亡的狀態,因此,多面向的檢測(不同樣本類型:細胞、組織;不同時間:凋亡早期、中期、晚期;形態學、DNA、細胞功能變化等等)對於凋亡檢測的深入研究便顯得尤為必要。

 

Apoptosis Assay Cocktail (Cat No. KTD102-EN)

基於以上現狀,Abbkine研發團隊精心開發出細胞凋亡檢測的整體解決方案產品—Apoptosis Assay Cocktail,以滿足大部分用戶差異化的檢測需求,讓凋亡檢測過程更輕鬆、結果更穩定可靠。下面小編就帶大家一起了解一下吧。

 

產品特色

1. 細胞凋亡研究的標準化解決方案

Annexin V 法和 TUNEL 法作為凋亡檢測的黃金標準,幾乎覆蓋了絕大多數細胞凋亡檢測的需求。獨特的Apoptosis Assay Cocktail不僅囊括了以上兩種檢測方法,同時還提供經專利設計的細胞凋亡陽性對照,可完美解決凋亡檢測結果非標準化之問題。

 

2. 高靈敏度、通用型凋亡檢測組合

經過精心設計和改良,該產品能同時檢測凋亡早期和凋亡晚期等不同階段,適合組織細胞等不同樣本,並能有效區分凋亡細胞壞死細胞

 

3. 應用廣泛

既可應用於流式細胞分析(FC),又能進行螢光顯微影像分析

 

實驗結果展示