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IP實驗高效開展,標籤蛋白沉澱無懈可擊!

IP實驗高效開展,標籤蛋白沉澱無懈可擊!

IP實驗高效開展

標籤蛋白(tag protein)沉澱無懈可擊!

 

 

聽說您還在使用傳統的Protein A/G來進行帶有標籤蛋白(tag protein)的目標蛋白萃取,看一看,Abbkine研發的新一代標籤蛋白免疫沉澱試劑盒,專項萃取,專精標籤,逐一擊破,純度再現,對於經典常用的幾個標籤蛋白都可以使用。

Cat No. Product Name Conjugate Size
KTI2014 IPKine™ Anti-DDDDK Magnetic IP Kit Magnetic Beads 20T/100T
KTI2024 IPKine™ Anti-GFP Magnetic IP Kit Magnetic Beads 20T/100T
KTI2034 IPKine™ Anti-GST Magnetic IP Kit Magnetic Beads 20T/100T
KTI2044 IPKine™ Anti-HA Magnetic IP Kit Magnetic Beads 20T/100T
KTI2064 IPKine™ Anti-Myc Magnetic IP Kit Magnetic Beads 20T/100T

 

以上5大標籤蛋白都是我們在實驗室經常會見到的tag,如果還有不太了解的地方,我們可以一起來學習相關的標籤蛋白知識。

 

 蛋白標籤(Protein tag)技術 

是指利用基因克隆手段,將具有特定功能的多肽,蛋白質結構域,甚至完整蛋白質與目標蛋白融合在一起,以實現目標蛋白的表達純化,檢測和追蹤等應用的技術。蛋白標籤融合已經成為蛋白質研究中最常用的技術之一,下面將詳細描述這些常用標籤的特點及應用。

1. HA

HA標籤,屬於小標籤,共9個胺基酸,標籤序列YPYDVPDYA,源於流感病毒的紅細胞凝集素表面抗原決定簇,對目標蛋白的空間結構影響小,可融合到N端或者C端。HA標籤常用於WB,IF和IP實驗,偶爾用於ELISA和ChIP分析。

2. Myc

Myc標籤,包含人類原癌基因Myc的10個胺基酸區段,序列為EQKLISEEDL,可融合到目標蛋白N端或者C端。由於可獲得高特異性抗Myc單株抗體,因此在Western blot,免疫螢光和免疫沉澱實驗中被廣泛使用,但是很少用於蛋白質純化。

3. Flag

FLAG標籤,是目標蛋白中一種比較流行的短肽標籤,序列為DYKDDDDK,可以與蛋白質的C端或N端融合。由於其包含腸激酶的識別位點(DDDDK),可方便去除,因此比較適合融合在目標蛋白N端。Flag標籤與同類標籤相比,更具親水性,因此通常不會變性或使與其連接的蛋白質失活,常用於真核表達系統中目標蛋白的檢測。

4. GST

GST標籤,是蛋白質純化最常用的標籤之一,GST是個大標籤,它是一個完整的蛋白質,分子量約26 KD。GST一方面具有高度可溶性,能夠增加目標蛋白的可溶性;另一方面它可以在大腸桿菌中大量表達,提高目標蛋白的表達量。因此被廣泛應用于各種融合蛋白的表達,可以在大腸桿菌和酵母菌等宿主細胞中表達。

5. GFP

GFP(Green fluorescent protein,綠色螢光蛋白)標籤含有238個胺基酸,分子量約為26.9K Da,在維多利亞多管發光水母(Aequorea victoria)中發現的,在紫外線的照射下會發出綠色螢光的蛋白,與目標蛋白融合後不會顯著地影響天然蛋白質的組裝和功能。EGFP標籤是增強型綠色螢光蛋白,與GFP相比,具有更高的折疊效率(由於正確折疊的蛋白質比例更高而增加的螢光),螢光強度更強、螢光性質更穩定。

 

經過優化的Abbkine標籤蛋白免疫沉澱試劑盒具有以下優異特性:

1. 特異性強、目標蛋白結合量高

≥6 mg 標籤融合蛋白/mL磁珠;

2. 可特異性結合多種型式的標籤蛋白(N端/C端)

3. 優質磁珠沉降速度快,無需等待

4. 試劑盒提供多種洗提 (Elution)方式

多肽競爭性洗提、酸性洗提和SDS-PAGE上樣緩衝液洗提。

 

Abbkine各標籤免疫沉澱試劑盒是您IP實驗神隊友,快快用起來吧,加速您的實驗進程,幫助您獲得良好的實驗結果!