【Proteintech】加速實驗 Blotting Accelerator 新品上架！
【Proteintech】加速實驗 Blotting Accelerator 新品上架！
40分鐘完成 WB封閉+抗體反應孵育！
蛋白質免疫印跡（Western Blot, WB）是常見的免疫學實驗，通常包括樣本製備、電泳、轉膜、封閉、抗體孵育、顯影等關鍵步驟。
其中，封閉及一抗/二抗的孵育過程往往需要數小時甚至過夜，影響了實驗效率。
Proteintech 創新推出的 Blotting Accelerator(Cat no : PR20039），只需40min即可完成封閉及抗體孵育，顯著縮短實驗時間；
且兼具封閉功能，簡化操作流程，讓WB實驗更快、更穩、更準！
高效省時：40min完成封閉及抗體孵育
與傳統WB抗體稀釋液相比，Blotting Accelerator 能在40min內完成封閉及抗體孵育，縮短80%反應時間，讓WB實驗直接立即節省3h，顯著提高實驗效率。
一液多用：兼具封閉及稀釋一抗/二抗功能
使用傳統WB抗體稀釋液需要單獨進行封閉，而 Blotting Accelerator 可直接用於一抗/二抗稀釋，無需額外進行封閉，即可獲得理想的檢測訊號，簡化了實驗流程！
廣泛相容：適配磷酸化抗體/HRP/螢光體系
Blotting Accelerator 具有廣泛的適用性，不僅用於常規抗體的稀釋，還適合磷酸化抗體的稀釋，且相容於HRP體系，可用於HRP標記的一抗/二抗，滿足不同實驗需求。
長效保存：抗體工作液4℃可存放3個月以上
本產品含有不同分子量範圍的惰性蛋白，可有效降低背景，並且保護抗體的活性，稀釋好的抗體，通常可以在4℃存放3個月以上。
※ 轉膜Transfer後，使用 不同WB抗體稀釋液 的反應時間比較圖 ※
與傳統稀釋液相比，Blotting Accelerator 40min完成封閉及抗體孵育，WB立即省下3h，顯著提高實驗效率。
注意事項 & 建議：
1. 本產品含有病理級防腐劑，與HRP相容，因此可稀釋一抗（包括磷酸化一抗）、HRP標記的一抗或二抗。
也可以稀釋螢光標記的一抗和二抗。
2. 如果您是首次使用本產品，可能需要優化抗體稀釋比例。
建議先設定二抗濃度（一般為0.05-0.1 ug/mL），設定一抗與二抗的反應時間後，再優化一抗濃度。
3. 如有個別結果不理想，可以適當調整一抗、二抗濃度或洗滌時間，優化成像或曝光時間。
4. 稀釋後的一抗或二抗可在4℃保存3個月以上，但不同一抗或二抗的保存時間長短不一，具體穩定期請自行判斷。
5. 本產品含有防腐劑 ProClin 300，操作時請穿戴工作服及一次性手套。
6. 本產品僅供專業實驗室科學研究使用，不可用於醫療、食品或製藥用途。
7. 本產品含有BSA，不能用於稀釋anti-BSA一抗。
8. 本產品為半透明膠體。如有不溶性或塊狀聚集體，請勿使用。
9. 使用本產品前，請先將溶液平衡至室溫（25℃）或預熱至37℃以確保效果。
室溫（25℃）或37℃孵育對實驗結果無顯著影響。但如果室溫低於25℃，建議將溶液預熱。
常見問題 Q&A
Q1. 我是否需要在整個印跡實驗(Western Blot, WB)過程中使用該產品？
A1：不需要。使用本產品的步驟依照建議的條件即可，不使用本產品的步驟則以常規方式進行。
Q2. 使用本產品對一抗或二抗的廠商有什麼要求嗎？
A2：沒有要求。
Q3.使用本產品時，可以設定哪些步驟停止，如何設定？
A3：使用本產品的可選停止點有：
（1）Blocking封閉（可選）。
將 membrane 直接浸泡在PBST/TBST洗滌液中或本產品中，以4℃為終止點（30分鐘至24小時）。
重新開始實驗時，將 membrane 移至室溫平衡溫度，以便進行後續實驗。
（2）After the primary antibody 一抗反應之後 。
一抗反應結束後，直接將 membrane 浸泡在PBST/TBST洗滌液中，室溫靜置作為終止點（30分鐘至4小時為宜）。
重新開始實驗時，需用洗滌液洗滌膜3次，每次1分鐘。洗滌後即可加入二抗體。
（3）After the secondary antibody 二抗反應之後。
二抗反應結束後，直接將 membrane 浸泡在PBST/TBST洗滌液中，室溫靜置作為終止點（30分鐘至4小時為宜）。
重新開始實驗時，需用洗滌液洗滌膜3次，每次1分鐘。洗滌完成後即可加入 substrate 進行成像(壓/拍片)。
Blotting Accelerator 使用步驟：
1. Electrophoresis電泳 及 Transfer轉膜,，依常規方法進行。
2. Blocking封閉（可選）。
Transfer轉膜後，將 membrane 放入反應盒中，用洗滌液（TBST或PBST）沖洗3-5秒，棄去洗滌液。
加入適量本產品（完全覆蓋膜），置於 shaker 水平搖床上，低速 室溫或37℃反應約5分鐘。
注意：如果後續步驟使用本產品作為稀釋液，可以省略 Blocking封閉 步驟（即沖洗後棄去洗滌液，直接加入稀釋後的一抗）。
如果後續步驟使用其他稀釋液，或計劃將一抗反應時間延長至25分鐘以上，則不建議省略 Blocking封閉 步驟。
使用本產品進行5分鐘的 Blocking封閉 步驟即可達到預期效果，延長時間通常不會有太大影響。
如果希望以此步驟作為實驗的終止點，可以在4℃（30分鐘至24小時）下進行 Blocking封閉 步驟。
3. Primary antibody incubation 一抗反應孵育
3.1 用本產品預先稀釋一抗。Blocking封閉 結束後，棄去封閉液，加入適量（完全覆蓋膜）的一抗稀釋液。
如有過量的一抗稀釋液，請置於4℃保存。
備註：Blocking封閉 結束時，可直接加入一抗稀釋液，無需洗滌。如需洗滌，可用常規洗滌液簡單洗滌一次。
3.2 將反應盒置於 shaker水平搖床 上，搖勻一抗稀釋液，再加入一抗，然後於室溫或37℃ 緩慢搖勻反應 10-25分鐘，
對於某些高親和力抗體可縮短至5分鐘以內。
3.3 一抗反應孵育結束後，建議使用PBST或TBST緩衝液進行洗滌。
將反應盒置於 shaker水平搖床 上，加入適量洗滌液快速洗滌2次（每次3-5秒），再以洗滌液洗滌3次（每次1分鐘）。
4. Incubation of secondary antibody 二抗反應孵育
（若一抗為HRP標記的一抗，則可不進行此步驟，直接進行步驟5）。
4.1 預先以本產品稀釋二抗。一抗稀釋液洗滌後，加入適量（完全覆蓋膜）二抗稀釋液。若二抗稀釋液過量，請置於4°C保存。
4.2 將反應盒置於 shaker水平搖床 上，搖勻二抗稀釋液，再加入二抗，於室溫或37℃ 慢速搖勻反應 8-15分鐘。
4.3 二抗反應孵育結束後，建議使用PBST或TBST緩衝液洗滌。
將反應盒置於水平搖床上，加入適量洗滌液快速洗滌2次（每次3-5秒），然後再用洗滌液洗滌3次（每次1分鐘）。
5. 洗滌後即可加入 substrate底物 ，進行壓/拍片。
( chemiluminescence imager detection化學發光成像儀檢測 或 darkroom imaging operation暗室成像操作 )
資料來源：Proteintech
相關資訊：
Proteintech 官網連結：Blotting Accelerator
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