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Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit (Cat. No. KTA8010)

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
(Cat. No. KTA8010)

產品介紹

在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，螢火蟲螢光素酶（Firefly luciferase）可以催化螢火蟲螢光素（Luciferin）產生氧化螢光素（Oxyluciferin），在螢光素被氧化的過程中，會產生光訊號。在氧氣存在的條件下，海腎螢光素酶（Renilla luciferase）可以催化腔腸素（Coelenterazine）氧化成腸醯胺（Coelenteramide），在腔腸素氧化的過程中也會產生光訊號。

通常將感興趣基因的轉錄調控元件或 5'-啟動子區克隆在 Luciferase 的上游，或把3'-UTR區克隆在Luciferase 的下游，構建成報告基因（Reporter gene）質體，然後轉染細胞，用適當藥物等處理細胞後裂解細胞，透過檢測螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理對目標基因的轉錄調控作用。海腎螢光素酶更多地被用作檢測轉染效率的內部對照，以消除細胞數量和轉染效率的差異。雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit)先以螢火蟲螢光素為底物檢測螢火蟲螢光素酶活性，再加入抑制螢火蟲螢光素酶催化的物質，同時加入腔腸素檢測海腎螢光素酶活性，以實現雙螢光素酶報告基因檢測。本試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測範圍廣，無細胞內源活性干擾等特性。

產品特點

• 發光強度高。
• 檢測靈敏度高，測定樣品的線性範圍寬。
• 操作便捷，讀取值穩定，速度快。
• 對各種培養基相容性強。

保存條件

於-20℃，避光保存12個月

注意事項

• 本產品僅供科學研究使用，不適用於臨床診斷。
• 由於溫度對酵素反應有影響，所以測定時，樣品和試劑均需達到室溫後再進行檢測。較高的溫度會導致訊號強度增加，但訊號穩定性較低，因此建議操作環境溫度不超過 25℃。
• 高活性的螢光素酶能夠更快速地催化底物發光，產生大量的光訊號。然而，這種快速反應往往會導致發光訊號的半衰期縮短。
• 為取得最佳測定效果，在用單管的化學發光儀測定時，每個樣品和測定試劑混合後到測定前的時間應盡量控制一致；使用具有化學發光測定功能的多功能螢光酶標儀(multimode reader)時，宜先把樣品全部加好，然後統一加入Firefly Luciferase Solution。
• 檢測時需使用全黑色或白色的 96 孔盤，以防止相鄰孔的干擾。
• 螢火蟲螢光素酶催化生物發光最強波長 560 nm，海腎螢光素酶催化生物發光最強波長為480nm。
• Renilla Luciferase Substrate 易揮發，注意密封保存。

產品規格

Cat. No.	Product Name	Size
KTA8010	Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit	100T / 500T

Cat. No.	Product Name	Size
KTA8011	Luciferase Reporter Gene Assay Kit	100T / 1000T
KTA8012	Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit	100T / 1000T

產品資訊