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揭開粒線體呼吸鏈複合體(Mitochondrial respiratory chain complexes)的神秘面紗！

揭開粒線體呼吸鏈複合體

(Mitochondrial respiratory chain complexes) 的神秘面紗！

1. 什麼是粒線體呼吸鏈複合體(Mitochondrial respiratory chain complexes)？

粒線體呼吸鏈複合體位於粒線體內膜上，由5個複合物組成，這5個複合物分別是：

Complex I：NADH ubiquinone oxidoreductase；

Complex II：Succinate-CoQ reductase；

Complex III：Cytochrome c reductase；

Complex IV：Cytochrome c oxidase；

Complex V：F1F0 ATPase 。通過一系列的氧化還原過程最終形成ATP，為細胞組織提供能量。

2. 為什麼要研究粒線體呼吸鏈複合體？

粒線體呼吸鏈複合體活性與粒線體功能密不可分，粒線體酵素缺陷會造成粒線體疾病，粒線體呼吸鏈複合體活性長期被抑制可能會導致神經性疾病如：帕金森氏症、唐氏症 (Down's syndrome)、雷氏症候群 (Reye's Syndrome)等。
因此，粒線體呼吸鏈複合體活性常常作為粒線體毒性誘導的神經缺陷疾病的指示劑。

3. 研究粒線體呼吸鏈複合體的工具有哪些？

CheKine™ Micro Mitochondrial complex Ⅰ Activity Assay Kit

ComplexⅠ又稱NADH ubiquinone oxidoreductase，廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞的粒線體中，是粒線體內膜中最大的蛋白複合物。利用催化一對電子從NADH傳遞給CoQ，同時可使O2還原生成O2.-，是電子傳遞鏈上產生O2.-的主要部位。測定該酵素活性，不僅可以反映電子傳遞鏈（ETC）的狀態，而且可以反映活性氧（ROS）生成的狀態。
其檢測原理主要基於ComplexⅠ能夠催化NADH脫氫生成NAD+，並直接讀取340 nm 下NADH的氧化速率從而計算出酵素活性的大小。

CheKine™ Micro Mitochondrial complex Ⅱ Activity Assay Kit

Complex Ⅱ又稱succinate-CoQ reductase，廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞的粒線體中，催化succinate氧化生成fumarate，同時輔基 FAD 還原為FADH2，後者進一步將氧化型輔酶Q還原成還原型輔酶Q，是電子傳遞鏈的分支。
其檢測原理是Complex Ⅱ的催化產物還原型輔酶Q可進一步還原2,6-dichlorophenol Indophenol，2,6-dichlorophenol Indophenol 在605 nm有吸收峰，通過檢測2,6-dichlorophenol Indophenol的減少速率來計算Complex Ⅱ的活性。

CheKine™ Micro Mitochondrial complex Ⅲ Activity Assay Kit

Complex Ⅲ之檢測原理為把還原型CoQ的氫傳遞給cytochrome c，生成還原型cytochrome c，與氧化型cytochrome c不同，還原型cytochrome c在550nm有吸收光，因此，550nm吸收光的增加速率能夠反映Complex Ⅲ的酵素活性。可檢測動、植物組織和細胞樣本。

CheKine™ Micro Mitochondrial complex Ⅳ Activity Assay Kit

Complex Ⅳ又稱cytochrome c oxidase，也是粒線體電子傳遞鏈主路和支路的共同成分，負責催化還原型cytochrome c 的氧化，並最終把電子傳遞給氧，生成水。
其檢測原理是還原型cytochrome c  在550 nm有吸收光，Complex Ⅳ可以催化還原型cytochrome c 生成氧化型cytochrome c，因此，550nm吸收光的下降速率能夠反映Complex Ⅳ酵素活性。該檢測方法操作簡單方便，檢測更靈敏準確。

CheKine™ Micro Mitochondrial complex Ⅴ Activity Assay Kit

Complex Ⅴ 又稱 F1F0 ATPase，廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞的粒線體中，由F1 和F0 兩個亞單位組成。該酵素利用呼吸鏈產生的質子電化學梯度催化ATP合成，也可以反向水解ATP。此外，Complex Ⅴ 還存在於葉綠體、異營菌和光合細菌中。Complex Ⅴ 是粒線體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶。
其檢測原理是複合體Ⅴ可以水解ATP產生ADP和Pi，然後可以通過測定Pi增加速率來檢測Complex Ⅴ的活性。

4. 產品優勢在哪裡？

    1) 操作流程簡便快速

    相比分光光度計法，微量法使實驗操作更簡便快捷、節省時間，適合多樣本檢測；

    2) 檢測結果更靈敏準確

    實驗原理經精心設計，提供標準品及標準曲線，且每個產品根據實際情況均提供樣本蛋白濃度測定最佳方法；

    3) 兼容多種類型實驗

    動物組織樣本、植物組織樣本、細胞樣本；

    4) 提供真實可靠的樣本驗證結果和參考文獻

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